目前臨床使用朝醫(yī)經(jīng)典方劑千金文武湯（《東醫(yī)四象新編》）用于治療糖尿病具有顯著療效。本文以該方劑藥味中共有活性部位總黃酮的提取量為指標，優(yōu)選提取工藝。
儀器與試藥
756PC型紫外可見分光光度計（上海恒平）；DV114C型電子天平（奧豪斯儀器上海有限公司）；蘆�。ㄙ徸灾兴幤飞镏破窓z驗所，批號：８１８－９４０１）；藥材為：葛根、黃芩、山藥、麥門冬、五味子、桔梗、白芷；水為純水，其他試劑均為分析純。
方法與結(jié)果
１．處方分析：千金文武湯處方由葛根、山藥、黃芩、麥門冬、五味子、桔梗、白芷七味藥組成，具有補肺斂肺、潤燥化痰、生津解表的功效，主要用于太陰人下消，小便不禁等證，目前朝醫(yī)臨床常用其治療ＤＭ。方中主藥葛根中黃酮類成分葛根素、黃芩中黃酮類成分黃芩苷有明確
降血糖或降血脂作用。故以葛根、黃芩為主，結(jié)合其他藥味，選擇總黃酮為該方劑提取的指標成分�？傸S酮含量測定方法學考察：采用紫外分光光度法，建立總黃酮含量的測定方法。
２．溶液的配制。
對照品溶液：用奧豪斯電子天平精密稱取干燥至恒重的蘆�。担罚恚纾眠m量水溶解后定容至１００ｍｌ，即得。樣品溶液：奧豪斯電子天平稱取處方量藥材，加入１２倍量水浸泡１ｈ，加熱煎煮提�。保�，濾過，再加入１０倍量水提�。保瑁瑸V過，合并濾液，定容至１�。玻埃埃恚�，即得。供試品溶液：在用奧豪斯移液器精密吸取樣品溶液１ｍｌ于蒸發(fā)皿中，加１ｇ聚酰胺粉吸附，于恒重干燥箱中，５０℃揮干溶劑，轉(zhuǎn)入層析柱，用３０ｍｌ石油醚洗脫，棄石油醚，再用３０ｍｌ甲醇洗脫總黃酮，收集洗脫液，減壓蒸干，殘渣用甲醇溶液溶解并定容至２５ｍｌ即得。
３．線性關系的考察：奧豪斯移液器精密量取對照品溶液１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０ｍｌ至１０ｍｌ容量瓶中，用水定容，在２５６ｎｍ處測定吸光度。以吸光度值（Ｙ）對濃度（Ｘ）進行回歸，得到其回歸方程。結(jié)果表明，對照品溶液濃度與吸光度值呈良好的線性關系。
４．精密度考察：用奧豪斯移液器精密量取上述對照品溶液，重復測定５次，ＲＳＤ為０．７７％，表明儀器精密度良好。
５．穩(wěn)定性考察：用奧豪斯移液器精密量取同一供試品溶液，分別于０、２、４、８、１２、２４ｈ進行測定，ＲＳＤ為０．９１％，表明供試品溶液在２４ｈ內(nèi)穩(wěn)定。
６．重現(xiàn)性考察：用奧豪斯電子天平精密稱取同一批樣品溶液５份，按供試品溶液項下制備，按上述方法測定，ＲＳＤ 為０．９５％，表明本法重現(xiàn)性良好。
７．加樣回收率考察：用奧豪斯移液器精密量取已知含量的樣品溶液共６份，分別精密加入對照品適量，按供試品溶液項下制備，測定，計算回收率。本法平均回收率為９７．７７％，ＲＳＤ為１．５４ ％，表明本法準確度較好，方法可行。
８．樣品濃度與吸光度線性關系考察：精密量�。保恚鞓悠啡芤�，用蒸餾水定容至５０ｍｌ，分別精吸１、２、３、４、５ｍｌ置１０ｍｌ容量瓶中，用蒸餾水定容，在２５６ｎｍ處測吸光度值。以吸光度值（Ｙ）對濃度（Ｘ）進行回歸，得其回歸方程。結(jié)果表明，樣品濃度與吸光度值呈良好的線性關系，表明以總黃酮含量作為樣品測定指標合理、可行。
提取工藝優(yōu)化
１．試驗方案的設計：采用正交設計試驗，以樣品中總黃酮含量為評價指標，優(yōu)選提取工藝。復方制劑實際生產(chǎn)中提取次數(shù)一般為２次，所以在提取工藝中，提取時間、溶劑用量是影響總黃酮提取量的主要因素。因此，選用Ｌ４（２２）正交設計安排實驗。結(jié)果分析：以各實驗組總黃酮的含量為指標進行分析。結(jié)果表明，在所選因素的水平范圍內(nèi)，因素Ａ（提取時間）、Ｂ（溶劑用量）對總黃酮提取量均無顯著性影響。通過正交試驗所得結(jié)果進行直觀選擇，提取工藝為Ａ２Ｂ１，即提取時間為９０ｍｉｎ／４５ｍｉｎ，溶劑用量為１２倍／１０倍。
２．驗證性實驗：按照上述優(yōu)化提取工藝進行提取，重復進行３次平行試驗，測得樣品中總黃酮含量為（３．５３２±０．０５）ｍｇ／ｇ，與正交實驗大值３．６３５ｍｇ／ｇ接近，表明該工藝穩(wěn)定、可行。
討論
本文采用紫外分光光度法作為千金文武湯的含量測定方法，結(jié)果平均回收率為９７．７７ ％，ＲＳＤ為１．５４％，表明此法準確、可靠，可用于總黃酮的含量測定。優(yōu)化的提取工藝為：提取時間為９０ｍｉｎ／４５ｍｉｎ，溶劑用量為１２倍／１０倍。
