1 材料與方法

  1.1 儀器與試藥日本島津甲溶液輸送泵; 上海恒平的紫外檢測器; 奧豪斯儀器上海有限公司移液器AH-10；奧豪斯電子天平(CP153型) 。綠原酸對照品, 供含量測定用，中藥品生物制品檢定所提供。乙睛, 色譜純, 美Fi sher 公司; 其它試劑均為分析純。

  1.2 色譜條件（250x4.6mm) 色譜柱, 柱溫:30 ℃ ;流動(dòng)相: 乙睛一.0 4 % 磷酸( 10:90 ), 流速: 1.0ml/min ; 檢測波長: 327nm。在此色譜條件下, 供試品色譜中, 在與對照品色譜相同的保留時(shí)間處有色譜峰(保留時(shí)間19分鐘）。

  1.3 利用奧豪斯電子天平CP153型精密稱定50g樣品, 置錐形瓶中, 用奧豪斯移液器精密量取加人50 % 甲醇溶液，在稱定重量, 超聲處理( 功率巧150w，頻率20khz) 30分鐘, 取出, 在用奧豪斯電子天平稱定重量, 用50 % 甲醇溶液補(bǔ)足減失的重量, 搖勻, 濾過, 作為供試品溶液。

  2 系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

  2.1 柱效的考察按正文方法測定綠原酸的對照品色譜圖, 測得理論板數(shù)綠原酸峰計(jì)算不低于4000。在此條件下樣品可得到很好的分離, 主峰前后無雜質(zhì)蜂, 分離度符合規(guī)定。

  2. 2 測定波長的選擇取綠原酸對照品溶液( 30ug/L), 照紫外分光光度法, 在10 一3 70 mn 波長范圍內(nèi)測定吸收度, 繪制曲線, 對照品溶液在3 27nm處有大吸收, 故選擇327 mn 為測定波長。

  2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:利用奧豪斯電子天平精密稱取綠原酸對照品, 加50 % 甲醇制成每1ML含31.2mg 的溶液, 在用奧豪斯移液器精密吸取此液4,7,10ul各注人液相色譜儀, 測定, 以峰面積積分值為縱坐標(biāo), 綠原酸含量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到一近似通過原點(diǎn)的直線。結(jié)果表明, 綠原酸量在124.8-499.6ug范圍內(nèi), 峰面積積分值與綠原酸含量呈良好線性關(guān)系。

  2.4 重現(xiàn)性試驗(yàn)按本文綠原酸含量測定項(xiàng)下操作, 對同一批樣品制成5 份供試品溶液, 依次進(jìn)樣測定, 用測定值的相對偏差反應(yīng)測定結(jié)果的重現(xiàn)性。結(jié)果Rs D 為1.47 %。

  2.5 精密度及穩(wěn)定性測定按本標(biāo)準(zhǔn)中含量測定項(xiàng)下操作. 取同一供試品,每隔一段時(shí)間重復(fù)進(jìn)樣測定, 用測定值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差反應(yīng)測定結(jié)果的精密度、穩(wěn)定性, 結(jié)果表明, 本方法精密度良好, 樣品在8小時(shí)內(nèi)測定穩(wěn)定。

  2 .6 回收率試驗(yàn)用奧豪斯電子天平CP153型分別精密稱取已知含量( 0.55mg/粒) 的樣品0.60g 共計(jì)5 份, 置錐形瓶中, 精密加人綠原酸對照品溶液(0.120mg/ml)5.0ml ，再精密加入50 % 甲醇超聲處理30 分鐘, 按含量測定項(xiàng)下方法進(jìn)行操作, 同法制得5 組供試品溶液, 按本標(biāo)準(zhǔn)“ 含量測定”項(xiàng)下方法進(jìn)行測定, 計(jì)算回收率。

  2.7 樣品測定采用本標(biāo)準(zhǔn)含量測定項(xiàng)下方法, 要對本品10 批樣品中綠原酸的含量進(jìn)行測定, 結(jié)果見表討論為保證制劑質(zhì)量, 試驗(yàn)中采用本標(biāo)準(zhǔn)中“ 含量測定” 項(xiàng)下方法, 測定了不同來源的返魂草藥材中綠原酸的含量。并限定返魂草藥材以干燥品計(jì)算, 含綠原酸不得少于0.12 % �？紤]藥材產(chǎn)地、加工及生產(chǎn)等因素的影響, 標(biāo)準(zhǔn)中限定制劑中每粒膠囊中含返魂草以綠原酸不得少于o.32 mg。